日前,由淡水渔业研究中心刘波研究员等人发明的“一种团头鲂外周血白细胞分离和原代培养方法”获得国家发明专利授权,专利号为ZL201610333068.0。
本发明涉及一种团头鲂外周血白细胞分离和原代培养方法,主要包括动物强化培养、血液收集、白细胞分离和培养等步骤。按照常规方法在无菌环境中抽取一定量鱼血,然后采用Percoll梯度离心的方法分离血液中外周白细胞,将所得细胞进行洗涤纯化,并放在适宜温度中进行培养。所述步骤中,以改良的RPMI—1640培养液作为培养基,配置不同浓度的Percoll分离液,细胞在培养温度27℃、95%湿度、5%CO2环境中进行原代培养2h以上即可贴壁生长。采用本发明能够获得团头魴生长良好的外周血白细胞,为团头鲂毒理学、免疫学、生理学和内分泌学等研究的开展奠定基础。